На современном этапе развития животноводства особо актуальна проблема сохранения поголовья животных и повышения их продуктивности, в связи с этим необходимо изыскание и изучение биологически активных веществ, повышающих жизнестойкость и продуктивность животных. К таким веществам относятся иммуноглобулины – белки животного происхождения, обладающие защитными свойствами. По химической природе иммуноглобулины представляют собой сложные белки – гликопротеиды, содержащие углеводы. В сыворотке крови человека обнаружены и идентифицированы пять классов иммуноглобулинов – G, M, A, D и Е, а в сыворотке крови сельскохозяйственных животных – G, М и А. Иммуноглобулины защищают организм от вирусов и бактерий, нейтрализуют чужеродные антигены, создают условия для оптимального течения биохимических процессов, ведущих к повышению продуктивности животных.     К настоящему времени достигнуты определенные успехи в изучении иммуноглобулинов сельскохозяйственных животных ( 1.2.3.4).. Между тем, требуют дальнейшей разработки методы выделения и идентификации иммуноглобулинов , особенно IgМ и IgA и их количественное определение. Недостаточно изучен белковый состав сыворотки крови овец, крупного рогатого скота в норме и при различных заболеваниях. Особый научно-практический интерес представляет белковый и иммуноглобулиновый спектр сыворотки крови новорожденных животных и их динамика в постнатальном онтогенезе. Актуальность изучения белков сыворотки крови связано с тем, что они находятся в постоянном обмене с белками органов и тканей, влияют на интенсивность обменных процессов и продуктивность животных. Проведение современных биохимических исследований способствует установлению иммунологического статуса животных и могут быть использованы в селекционной работе при совершенствовании существующих и создании новых пород и породных групп животных. В этой связи особо актуальным является изучение спектра иммуноглобулинов в онтогенезе молодняка сельскохозяйственных животных . в частности в первые часы раннего онтогенеза, так как именно в этот период онтогенеза формируется иммунная система животных – основа защитных сил организма и его продуктивности.

Цель исследования - изучить белковый и иммуноглобулиновый состав сыворотки крови новорожденных ягнят и телят до приема молозива.

Задачи исследования.

1. Проводить сравнительное изучение белкового состава сыворотки крови овцематки и ее двух новорожденных ягнят.
   
2. Проводить сравнительное изучение белкового состава сыворотки крови новорожденных ягнят и телят до кормления молозивом.
   
3. Проводить сравнительное изучение иммуноглобулинового спектра новорожденных ягнят и телят электрофорезом в агаровом геле до кормления молозивом
   
4. Проводить сравнительное изучение иммуноглобулинового спектра новорожденных ягнят и телят иммуноэлектрофорезом в агаровом геле до кормления молозивом.
   
5. Проводить сравнительное изучение иммуноглобулинового спектра новорожденных ягнят и телят методом радиальной иммунодиффузии в агаровом геле до кормления молозивом.

Материалы и методы исследования

Белковый и имvуноглобулиновый состав сыворотки крови новорожденных ягнят и телят изучали электрофорезом, иммуноэлектрофорезом и радиальной иммунодиффузией. Взятие крови у новорожденных ягнят и телят производилось в течение 10-30 минут после рождения до приема молозива.

Электрофорез в агаровом геле проводили в боратно-ацетатном буфере, рН 8,6, в электрофоретической камере (5,6) сделанной из плексигласа (рис.1).

Рис.1 Камера для электрофореза в агаровом геле. 1- кюветы для электродов. 2.- поднос с «мостиками» для контакта агарового геля с буферным раствором. 3- съемная пластинка для электрофоретического разделения

Состав буфера: 43,55 г ацетата натрия, 52,58 г борной кислоты и 76,28 г буры растворяли в 10 л дистиллированной воды. рН буфера – 8,6.

Иммуноэлектрофоретическое изучение сыворотки крови (1) также проводили в боратно-ацетатном буфере с использованием антисывороток против белков барана и быка (7). Изучение иммуноглобулинового состава сыворотки крови проводили в боратно-ацетатном буфере методом радиальной иммунодиффузии с использованием моноспецифических иммунных сывороток к иммуноглобулинам овец и коров(8, 9,10).

Полученные результаты

Изучение иммуноглобулинового спектра сыворотки крови новорожденных ягнят и телят проводили электрофорез в агаровом геле до приема молозива. Полученные результаты приведены в таблице 1.

Табл.1. Результаты изучения иммуноглобулинового спектра сыворотки крови новорожденных ягнят и телят электрофорезом в агаровом геле до приема молозива

Как видно из таблицы 1 у некоторых исследованных новорожденных ягнят и телят электрофорезом в агаровом геле обнаруживается IgG1 и не выявляется IgG2. Обычно также не выявляются IgM и IgA, хотя этот факт можно связать с разрешающей возможностью электрофореза в агаровом геле. Изучение иммуноглобулинового спектра сыворотки крови новорожденных ягнят и телят проводили также более чувствительным методом – иммуноэлектрофорезом в агаровом геле до приема молозива. Полученные результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2.Результаты изучения иммуноглобулинового спектра сыворотки крови новорожденных ягнят и телят методом иммуноэлектрофореза.

Как видно из таблицы 2 существенных результатов не были получены по сравнению с электрофорезом в агаровом геле, хотя количество новорожденных содержащих IgM выросло до 7 у ягнят. Результаты изучения иммуноглобулинового спектра сыворотки крови наиболее чувствительным метом- радиальной иммунодифузией приведены в таблице 3.

Таблиц.3. Результаты изучения иммуноглобулинового спектра сыворотки крови новорожденных ягнят и телят до приема молозива методом радиальной иммуннодифузии

Из таблицы видно, что радиальной иммунодиффузии получаются такие же результаты. как и при иммуноэлектрофорезе, и во всех применяемых методах не обнаруживаются IgG2 и IgA .

Результаты электрофоретического изучения белкового состава сыворотки крови овцематки и двух ее новорожденных ягнят до приема молозива приведены в таблице 4.

Как видно из таблицы 4, в сыворотках крови двух новорожденных ягнят одной овцематки методом электрофореза в агаровом геле определяются всего пять фракций – альбумин, α₁-, α_2- и β₁-, β₂- глобулины и не обнаруживаются γ₁
и γ₂ (рис.1), что также подтверждается иммуноэлектрофорезом (рис.2).

1 2 1 2

Рис.1. Электрофореграмма сыворотки крови овцематки и ее двух ягнят.

                 2 1 2

Рис.2. Иммуноэлектрофореграмма сыворотки крови овцематки и двух ее новорожденных ягнят до приема молозива.

1 2 3 2 4 2 5 2 6 2

Рис.3. Электрофореграммы сыворотки крови коров различных отелов и их новорожденных телят

1. Сыворотка крови коровы 6-отела. 2. Сыворотки крови новорожденных телят. 3. Сыворотка крови коровы 5-отела. 4. Сыворотка крови коровы 4-отела 5. Сыворотка крови коровы 2-отела. 6. Сыворотка крови коровы 1-отела.

Результаты сравнительного изучения белкового состава сыворотки крови новорожденных ягнят казахской тонкорунной породы, телят алатауской породы до приема молозива, полученных электрофорезом в агаровом геле, приведены в табл.5.

Табл.5. Белковый состав сыворотки крови новорожденных животных до приема молозива (М ⁺_- m).

1. Жумашев Ж.Ж., Алимжанова Ш.С., Туганбекова М.А., Сеитов З.С., Турсынбаев К.Ш. Выделение, идентификация и количественное определение иммуноглобулинов в сыворотке крови овец и крупного рогатого скота. / Методические рекомендации. – Алма-ата, 1985. – 50 с.
2. Жумашев Ж.Ж., Мартинес М.Р., Сеитов З.С., Туганбекова М.А., Алимжанова Ш.С. Физико-химические свойства и антигенные взаимоотношения иммуноглобулинов G сельскохозяйственных животных // Вестн. АН КазССР. – 1986. – N12. – с. 63-70.
3. Федоров Ю.Н. Онтогенез иммунной системы у жвачных животных // Тр. ВИЭВ. – 1985 а. – Т. 62. – с. 20-30.
4. Жумашев Ж.Ж., Бабаев М.Б., Алимжанова Ш.С., Туганбекова М.А. Иммуноглобулины в онтогенезе животных. //Монография. Алматы, 1994.-с.100-106.
5. Горохова Л.В. Модификация метода электрофореза в геле агара // Тр./ Ин-т физиол. АН.КазССР. – 1972. – Т. 17. – С. 75-78.
6. Жумашев Ж.Ж., Алимжанова Ш.С., Горяев М.И., Сеитов З.С. Электрофоретическое изучение белкового состава сыворотки овец // Изв. АН Каз.ССР. Сер. биол. – 1973. -N5. -с.66-71.
7. Жумашев Ж.Ж., Кенжеев Ш.Т., Алимжанова Ш.С. Иммунная система новорожденных ягнят и колостральный иммунитет. Исследования, результаты. 2008.
8. Жумашев Ж.Ж., Салханова С.Н. Иммуноглобулиновый состав молозива коров желательного типа, представляющие основные генеологические линии популяции бурого молочного скота». Матер. междунар. конф. в честь академика Сабденова К.С. 2008.
9. Джанабекова Г.К Жумашев Ж.Ж., Салханова С.Н. Способ получения иммуноглобулинов G1 и G2 из сыворотки крови крупного рогатого скота. Инновационный патент РК №21670. 2009.
10. Джанабекова Г.К., Жумашев Ж.Ж., Салханова С.Н. «Способ получения иммуноглобулинов М из сыворотки крови крупного рогатого скота». Инновационный патент РК №21310. 2009.
11. Джанабекова Г.К.,Жумашев Ж.Ж., Салханова С.Н. «Способ получения иммуноглобулинов А из сыворотки крови крупного рогатого скота». Инновационный патент РК №21308. 2009.
12. Жумашев Ж.Ж., Алданзаров С.С., Базилбаев С.М., Саримбекова С.Н., Салханова С.Н. «Об особенностях содержания иммуноглобулинов в молозиве коров в зависимости от генеалогических линий быков производителей». Матер. У11 съезда Казахского физиологического общества. Алматы. 2011.
13. Жумашев Ж.Ж., Алданзаров С.С., Базилбаев С.М., Саримбекова С.Н., Салханова С.Н. «Уровни иммуноглобулинов в сыворотке крови алатауских коров и их генотипов со швицами». Матер. У11 съезда Казахского физиологического общества. Алматы. 2011.

Все статьи автора «Токтарова Г. К.»